Зона лизиса

(Этапы)

1 Этап ВЫДЕЛЕНИЕ ФАГА:Фильтрацияисследуемого материала через бактериальныефильтры, нагревание до 75°С и /или обработкахлороформом с целью устранениясопутствующей микрофлоры

2. Этап ИНДИКАЦИЯ ФАГА:полученныйфильтрат вносят: а) в пробирку с бульоннойкультурой микроорганизма (напримерE.coli)к которому мы хотим выделить вирулентныйбактериофаг; б) на чашку с МПА засеянноймикроорганизмом:

3 ЭТАП ИДЕНТИФИКАЦИЯ ФАГАвисследуемом фильтрате качественнымипробами по методам Фишера,Фюрта,и Отто( «стекающая капля »).

4 Этап определение количественного содержания и активности фага

Титрование этоопределение количественного содержаниябактериофагав исследуемом материале.

Для этого пользуются двумяпоказателями: количеством активныхчастиц бактериофага, содержащихся в 1мл исследуемого материала, или величинойнаибольшего разведения, при которомбактериофаг проявляет свое литическоедействие.

Полученную при этом величинувыражают отрицательным логарифмом 10,где степень указывает разведение фага.

4.1Определение титра активностифага в жидкой питательной среде(пробирках) по Аппельмануосновано навнесении различного количества титруемогобактериофага в бульон, засеянный однойи той же дозой культуры гомологичныхмикробов, с целью получения феноменабактериофагии.

Результат: (+)- фаголизис индикаторного штамма ;– муть -рост индикаторногоштамма

Вывод:Титр активности бактериофага равен10-8

3.2 Определение количества фага методом агаровых слоев по Грациа

Количествобактериофагов выражают в количествебляшкообразующих единиц на 1 млисследуемого материала (БОЕ / мл). Бляшки– это зоны отсутствия роста бактерийв местах нанесения фага. Для расчетасодержания количества бактериофаговв 1 мл фаголизата необходимо умножитьколичество негативных колоний в газонеиндикаторной бактериальной культурына разведение исследуемого материала.

Пример расчета: на чашкеПетри из1мл разведения 10-3образовалось 43 негативных колонии(бляшек).В 1млфаголизата содержится 43х 10 3=43000 фаговых частиц, т.еконцентрациябактериофагов в фаголизате43000БОЕ / мл

Практическое использованиебактериофагов:ВРФ выпускают бактериофаги для леченияи профилактики1) кишечных инфекций — дизентерийныйполивалентный, сальмонеллезный,брюшнотифозный, 2) гнойно-воспалительныхзаболеваний — стафилококковый,стрептококковый, синегнойный, протейный,клебсиеллезный, коли-фаг.

Разработаныи комбинированные препараты из несколькихвидов бактериофагов: коли-протейный,пиобактериофаг (против стафилококков,стрептококков, клебсиелл, протея,синегнойной и кишечной палочек),интести-фаг (против шигелл, сальмонелл,стафилококков, энтерококков, кишечнойи синегнойной палочек, протея).3.

Фагодифференцировкадля дифференциации видов бактерийcхожихпо биохимической активности (напримерсальмонелл и бактерий рода Citrobacter)

4.Фаготипированиедлявыявления источника инфекции пристафилококковых инфекциях и брюшномтифе, так как фаги штаммоспецифичныи лизируют бактерии происхождением изодного источника

Источник: https://studfile.net/preview/5244766/page:2/

Зона лизиса

Обзор свойств и показаний разных бактериальных лизатов — грамотная консультация, исходя из запроса покупателя

Они появились в наших аптеках всего два десятилетия назад, но быстро заняли свою нишу и приобрели известность у врачей и пациентов.

Безрецептурные представители этой группы могут стать прекрасным инструментом, расширяющим возможности фармконсультации и позволяющим эффективно помочь клиенту аптеки.

Сегодня, когда эпидемиологический сезон в разгаре, самое время освежить знания о безрецептурных бактериальных лизатах, их свойствах и показаниях.

Что это такое

Лизатом (от греческого «лизис» — «разложение») называют суспензию, которая образуется в результате разрушения бактериальных клеток. Она включает частицы бактериофагов и обломки стенок микроорганизмов, которые не обладают патогенностью и, соответственно, не представляют инфекционной опасности для организма.

У «обломков» сохраняется специфическая структура и рецепторы, которые распознаются иммунной системой как враждебные. При этом организм концентрирует защитные силы, чтобы противостоять «натиску». В результате формируется селективный иммунный ответ против штаммов бактерий, которые использовались при производстве лизата.

Все бактериальные лизаты поливалентны, то есть содержат несколько штаммов различных микроорганизмов. Как правило, это патогены, которые чаще всего вызывают инфекции.

Каждый штамм бактерий культивируется in vitro, инактивируется и лизируется либо химически, либо механически, а затем проходит лиофилизацию — «холодную сушку». После этого полученные лизаты смешивают в определенных пропорциях [1].

Всё не так однозначно

В 2017 году итальянские ученые проанализировали 170 посвященных лизатам статей в Pubmed — крупнейшей англоязычной текстовой базе медицинских и биологических публикаций.

Они сделали вывод, что многие свойства и особенности действия препаратов этой группы еще недостаточно изучены, а качество самих исследований не является удовлетворительным.

По мнению авторов анализа, чтобы более полно изучить возможности лизатов, необходимо проводить дальнейшие исследования хорошего качества [2].

Таким образом, эффективность бактериальных лизатов нельзя назвать очевидной с точки зрения доказательной медицины.

Тем не менее, их назначают для стимуляции иммунного ответа при различных заболеваниях, в том числе в урологии (при хроническом цистите), гинекологии (для восстановления микрофлоры) и пульмонологии (для профилактики обострений ХОБЛ). Но наибольшую популярность бактериальные лизаты приобрели как препараты для лечения и профилактики респираторных инфекций.

Основная гипотеза, объясняющая механизм действия лизатов, предполагает усиление иммунного ответа за счет стимуляции клеточного и гуморального звена. Считается, что влияние лизатов на организм физиологичное, поскольку они естественным образом стимулируют собственные реакции на антиген и проявляют комплексный иммунотропный эффект [4]:

• Увеличивают выработку специфических антител к возбудителям, лизаты которых входят в состав препарата.
• Усиливают продукцию противовоспалительных цитокинов (интерлейкинов и других).
• Стимулируют фагоцитоз.
• Повышают синтез интерферона и других компонентов иммунного ответа.

Местные лизаты при попадании на слизистую оболочку верхних дыхательных путей образуют тонкий защитный слой. В основе их действия лежит усиление синтеза IgА и снижение выработки IgE, с которым сопряжена гиперчувствительность и аллергизация [5]. При этом местные препараты, так же как и системные, воздействуют на факторы специфического и неспецифического иммунитета.

Рекомендуем топические лизаты

Топические бактериальные лизаты относятся к ОТС-группе. Их ассортимент включает всего 2 лекарственных препарата, существенно отличающихся и по составу, и по показаниям.

Комплексный препарат бактериальных лизатов «ИРС 19»

Запросы клиента:

• препараты для профилактики ОРВИ;
• препараты для лечения заболеваний верхних дыхательных путей вирусной и инфекционной природы (в том числе гриппа и других ОРВИ);
• средства для восстановления местного иммунитета после перенесенных ОРВИ.

Свойства

Смесь лизатов, входящая в состав «ИРС 19», применяется в форме интраназального спрея в 35 странах мира [5]. Препарат содержит комбинацию лизатов наиболее распространенных возбудителей бактериальных инфекций респираторного тракта, в том числе пневмонийных стрептококков, гемофильной палочки, золотистых стафилококков, моракселл, энтерококков и некоторых других.

Интересно, что состав препарата периодически обновляется и изменяется с учетом преобладания основных возбудителей респираторных заболеваний ЛОР-органов и дыхательных путей [5].

«ИРС 19» может применяться при острых и хронических заболеваниях, а также как средство для профилактики инфекций и в период восстановления после уже перенесенного заболевания.

Как применять?

Препарат используют интраназально, доза и курс применения зависят от цели (профилактика или лечение) и возраста пациента.

На что обратить внимание клиента?

В начале лечения могут появиться чихание и усилиться выделения из носа. Обычно этот эффект носит кратковременный характер. Если реакция принимает тяжелое течение, рекомендуют уменьшить кратность введения препарата или вовсе отменить его [6].

«Имудон»

Запросы клиента:

• препараты для лечения и профилактики фарингита, тонзиллита, пародонтоза, пародонтита, стоматита, гингивита;
• средство для профилактики инфекции после удаления зубов;
• препарат для лечения изъязвлений, вызванных зубными протезами.

Свойства

Препарат представляет собой смесь лизатов бактерий, которые чаще всего вызывают воспалительные процессы в полости рта и глотки, в том числе нескольких штаммов лактобактерий, золотистого стафилококка, кишечной палочки, клебсиеллы, а также грибов рода кандида.

Как применять?

«Имудон» используют для лечения взрослых и детей старше 3 лет. Доза и курс лечения зависят от показаний и возраста. Таблетки рассасывают во рту, не разжевывая.

На что обратить внимание клиента?

В течение часа после приема препарата не следует принимать пищу и пить воду [7].

Системные лизаты: работа изнутри

Системные бактериальные лизаты, по мнению некоторых специалистов, более активны, чем местные, поскольку обеспечивают более длительный и прочный контакт со слизистыми оболочками (не смываются слюной) [8]. Единственным ОТС-представителем этой группы на сегодня является препарат «Исмиген».

«Исмиген»

Запросы клиента:

• препараты для лечения инфекций верхних и нижних дыхательных путей, лор-органов (бронхит, тонзиллит, фарингит, ларингит, ринит, синусит, отит и др.);
• средства для профилактики обострений рецидивирующих инфекций верхних и нижних дыхательных путей, хронического бронхита.

Свойства

«Исмиген» представляет собой бактериальный лизат, полученный механическим способом и обладающий высокой иммуногенностью [9].

Препарат содержит 14 штаммов 8 видов инактивированных патогенных бактерий, наиболее распространенных возбудителей инфекций верхних и нижних дыхательных путей, в том числе золотистого стафилококка, пиогенного стрептококка, пневмонийного стрептококка, клебсиеллы, гемофильной палочки, моракселлы и других. Его кардинальное отличие от других системных лизатов — сублингвальный (подъязычный) путь введения.

Препарат достаточно изучен: данные 15 рандомизированных исследований с участием более 2500 пациентов подтверждают, что прием «Исмигена» позволяет сократить число респираторных инфекций по сравнению с плацебо у детей и взрослых [9].

Как применять?

Препарат применяют для лечения и профилактики инфекций у взрослых и детей старше 3 лет. Дозировка при лечении и профилактике одинакова — 1 таблетка в сутки. Курс лечения длится не менее 10 дней, курс профилактики — три цикла по 10 дней с 20‑дневными интервалами [10].

На что обратить внимание клиента?

Подъязычные таблетки принимают натощак. Их держат под языком до полного растворения, не рассасывая и не разжевывая.

«Бронхо-мунал», «Бронхо-ваксом»

Свойства

Под торговыми названиями «Бронхо-мунал» и «Бронхо-ваксом» выпускается рецептурный системный химический бактериальный лизат ОМ-85. Он содержит лизаты 21 штамма 8 бактерий, которые наиболее часто вызывают острые респираторные бактериальные инфекции.

Среди них — лизаты пневмонийного и пиогенного стрептококка, клебсиеллы, золотистого стафилококка и другие. Некоторые специалисты полагают, что химический лизат менее предпочтителен, чем механический, поскольку химический лизис происходит с применением щелочи.

Это может приводить к денатурации белков и, как следствие, антигенов, что, в свою очередь, может привести к снижению иммуногенности [1].

Эффективность и переносимость ОМ-85 изучалась более чем в 300 научных работах, 40 из которых были рандомизированными контролируемыми исследованиями [11]. Их результаты подтвердили, что лечение ОМ-85 помогает предупреждать развитие различных респираторных инфекций у взрослых и детей старше 6 месяцев.

Как применять?

ОМ-85 применяют во взрослой и детской практике по 1 капсуле в сутки и для лечения, и для профилактики инфекционных заболеваний. Доза для детей 6 мес. — 12 лет — 3,5 мг в сутки, для взрослых и детей старше 12 лет — 7 мг в сутки. Длительность лечения — не менее 10 дней, профилактики — 3 курса по 10 дней каждый с промежутком 20 дней между ними [12].

На что обратить внимание клиента?

Препарат следует принимать утром, натощак. Детям, которым сложно проглотить капсулу, можно смешивать ее содержимое с чаем, молоком, соком.

Источники

1. Маркова Т. П., Ярилина Л. Г., Чувирова А. Г. Бактериальные лизаты. Новые препараты //РМЖ, 2014. № 24. С. 1764.
2. D’Alò G. L. et al. Bacterial lysates: history and availability //Igiene e sanita pubblica. 2017; 73 (4): 381–396.
3. Караулов А. В. Применение ОМ-85 в остром периоде для лечения острых респираторных инфекций: иммунологические механизмы и обоснование //Лечащий врач, 2017. № 11. С. 37–37.
4. Колосова Н. Г. Эффективность бактериальных лизатов в профилактике респираторных инфекций у детей //Лечащий врач, 2016. № 9. С. 47–47.
5. Савенкова М. С. Бактериальные лизаты: опыт применения при острых и хронических заболеваниях верхних дыхательных путей //Детские инфекции, 2011. Т. 10. № 4.
6. Инструкция по медицинскому применению препарата «ИРС-19».
7. Инструкция по медицинскому применению препарата «Имудон».
8. Cazzola M. A new bacterial lysate protects by reducing infections exacerbations in moderate to very severe COPD //Trends Med. 2006; 6: 199–207.
9. Арутюнов А. Г., Драгунов Д. О., Соколова А. В. Место бактериальных лизатов в терапии рецидивирующих бактериальных инфекций //РМЖ, 2014. Т. 22. № 31. С. 2176–2180.
10. Инструкция по медицинскому применению препарата «Исмиген».
11. Абатуров А. Е. и др. Бактериальные лизаты как ключевой медикаментозный компонент профилактики и лечения острых респираторных инфекций у детей //Здоровье ребенка, 2015. № 5. С. 65.
12. Инструкция по медицинскому применению препарата «Бронхо-Мунал».

Источник: www.katrenstyle.ru

Источник: https://naturalpeople.ru/zona-lizisa/