Ифа на гепатит с

Содержание
  1. Вирусный гепатит с ифа диагностика
  2. Как определить гепатит С?
  3. Основные методы лабораторной диагностики
  4. Когда можно обнаружить HCV в крови?
  5. Пцр диагностика
  6. Ифа на гепатит с положительный
  7. Когда необходимо исследование и его особенности
  8. Оценка результатов исследования
  9. Полимеразная цепная реакция
  10. Ифа гепатит с: что делать если результат анализа положительный?
  11. Особенности метода
  12. Показания к проведению ИФА
  13. Преимущества и недостатки
  14. Что выявляет и как проводится исследование
  15. Прямой метод ИФА
  16. Непрямой метод ИФА
  17. Расшифровка результатов
  18. Анализ ИФА на гепатит С: что это такое, показания, расшифровка
  19. Что такое ИФА?
  20. Показания к ИФА на гепатит С
  21. Как проводится анализ?
  22. Виды ИФА
  23. Непрямой метод
  24. Положительный
  25. Отрицательный
  26. Ложноположительный
  27. Ифа положительный, а пцр отрицательный: что это значит?
  28. Исследования на вирус гепатита С
  29. Антитела к вирусу гепатита С JgM
  30. Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)
  31. Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (количественно)
  32. Генотипирование вируса гепатита С – определение генотипа

Вирусный гепатит с ифа диагностика

Ифа на гепатит с

О возбудителе HCV-инфекции стало известно сравнительно недавно. До начала 1990-х годов точное выявление заболевания представляло собой серьезную проблему.

Это обусловило широкое распространение вируса при гемотрансфузионных процедурах и трансплантации органов, длительное течение инфекции без адекватной терапии.

Но сейчас диагностика гепатита С точна, анализы помогают прогнозировать эффективность терапии, а срок выполнения специфических исследований не превышает 3–5 дней. 

Так почему масштабы распространения HCV некоторые специалисты сравнивают с эпидемией? В современном российском законодательстве предусмотрена регулярная проверка на гепатит С методом ИФА как у людей из группы риска, так и у работников, способных инфицировать других. Тем не менее, многие не проходят регулярной диспансеризации и не сдают даже стандартные клинические анализы, не говоря о специфических исследованиях.

Но HCV далеко не всегда сопровождается какими-либо клиническими проявлениями, более того, характерные симптомы заболевания отмечают только у четверти пациентов.

Вирусная инфекция обычно протекает медленно, но репликация возбудителя патологии происходит постоянно. В результате наступает необратимая гибель гепатоцитов.

На месте клеток, утративших свои функции, появляются участки соединительной ткани – своего рода шрамы. 

Таким образом развивается фиброз, который, если не предпринять лечебных мер, перерастает в цирроз печени – тяжелое заболевание, сопровождающееся нарушением работы всех внутренних органов.

При диагностике на этой стадии можно избавиться от вируса. Однако изменения печеночной паренхимы остаются необратимыми.

В некоторых случаях больным требуется срочная трансплантация печени, а лечение начинают после проведения операции. 

Поэтому чем раньше поставлен точный диагноз, тем скорее доктор начинает терапию. Таким образом репликацию вируса останавливают еще до развития тяжелых осложнений. Однако обычных клинических исследований недостаточно для выявления инфекции. Необходимо сдать более специфичные анализы, отличающиеся как по технике выполнения, так и по особенностям расшифровки результатов. 

Сделать ряд диагностических тестов можно самостоятельно, но интерпретировать полученные данные (особенно если они положительны либо сомнительны) должен только врач.

Как определить гепатит С?

Заподозрить наличие инфекции можно по некоторым клиническим признакам. К их числу относят:

  • постоянное чувство слабости;
  • астенический синдром;
  • непереносимость физических нагрузок (ранее привычных);
  • сонливость;
  • эмоциональная раздражительность;
  • расстройства пищеварения различной интенсивности (могут отсутствовать, иногда проявляются в виде отсутствия аппетита, тошноты).

Но подобные симптомы не могут достоверно выявить HCV, так как данные признаки не специфичны и указывают на множество других патологий или обычное переутомление.

Как определить гепатит С у взрослых и у детей:

  • по анализу крови на содержание определенных иммуноглобулинов (ИФА);
  • по результатам исследования, проведенного методом полимеразной цепной реакции;
  • по биохимическому анализу на содержание печеночных проб, билирубина.

Недавно на фармацевтическом рынке появились диагностические наборы, позволяющие провести анализ на наличие гепатита С в домашних условиях. Подобные тест-системы менее чувствительны, чем исследования, проводимые в лаборатории. Но в целом, это быстрый и достаточно точный способ самодиагностики. 

Интерпретация результатов, особенно сомнительных, должна проводиться врачом. Положительный тест служит показанием для консультации доктора. 

Дополнительно необходима проверка показателей общеклинического теста крови и мочи. Перед началом лечения доктор оценивает состояние печени по данным неинвазивных исследований (УЗИ, эластометрия). При подозрении на тяжелые поражения ткани выполняют биопсию органа. 

Основные методы лабораторной диагностики

Учитывая длительное бессимптомное течение, результаты обычного анализа крови и мочи могут быть без каких-либо отклонений. Поэтому для выявления вируса гепатита Ц используют серологические (ИФА) и молекулярные (ПЦР) методы лабораторной диагностики. Для этого сдают кровь из вены в частной лаборатории либо поликлинике по месту жительства. Срок получения результатов – до 5 дней.

Когда можно обнаружить HCV в крови?

Основные методы диагностики патологии можно разделить на две группы. Молекулярные исследования направлены на обнаружение частиц вируса. Помимо наличия РНК возбудителя гепатита С, такой анализ показывает его количественное содержание и точный генотип. Серологическое исследование (ИФА) «реагирует» на выработку иммуноглобулинов, синтезируемых при попадании вируса в кровь человека. 

Уровень РНК, достаточный для лабораторного определения, достигается через 10–16 дней после инфицирования (если проводить диагностику современными высокочувствительными технологиями).

Количественно вирусную РНК можно определить позже, через 4–6 недель после заражения. Тогда же целесообразно проводить и генотипирование. Синтез антител начинается сразу же, при первом контакте вируса с кровью человека.

Но лабораторным путем при помощи анализа ИФА их можно обнаружить только через 3–4 недели. 

Возможность выявления вируса на ранних стадиях зависит от индивидуальных особенностей больного – сроков выработки антител и активности процессов репликации вируса. 

Какие анализы сдают при подозрении на гепатит С:

  • биохимия крови, печеночные пробы (отклонения от нормы могут лишь косвенно указывать на наличие гепатита С);
  • ИФА;
  • ПЦР.

Грамотное поэтапное полное обследование способствует исключению неопределенных результатов, дает максимально точную картину здоровья пациента в целом и позволяет врачу назначить правильное лечение. 

Пцр диагностика

Исследование методом ПЦР – самый точный анализ для обнаружения гепатита С в организме. Сам принцип постановки полимеразной цепной реакции достаточно сложен.

Для проведения необходим обработанный и соответствующим образом подготовленный образец биологического материала. К нему добавляют фермент, провоцирующий деление заданного участка РНК (при его наличии) в геометрической прогрессии.

Впоследствии определение частиц вируса проводят при помощи различных физико-химических методов.

Основные отличия ПЦР-диагностики гепатита C от исследования путем иммуноферментного анализа приведены в таблице:

Молекулярный тест, проведенный по методике ПЦРИммуноферментный анализ
Мишени для исследования
РНК вируса в кровиАнтитела к гепатиту С (класса G и М)
Разновидности анализа и изучаемые критерии
Качественный анализ позволяет ответить на главный вопрос, здоров человек или боленAnti HCV Total определяет в крови общий титр всех антител к возбудителю гепатита С вне зависимости от класса
Количественное исследование оценивает вирусную нагрузкуОпределение иммуноглобулинов по классам: обнаруженные маркеры IgG свидетельствует о хронической инфекции, IgM – об острой
Генотипирование служит для выявления разновидности патологииАнтитела с белку core и неструктурным протеинам HCV – это развернутый анализ, назначается нечасто, служит для дифференциальной  диагностики инфекции с другими заболеваниями, прогнозирования особенностей течения и исхода
Сроки диагностики
до 3 дней3–5 дней
Сроки обнаружения (с момента инфицирования)
10–14 днейЧерез 3–4 недели
Вероятность получения ложных результатов и ошибочной расшифровки
Минимальна, ошибки могут быть связаны с неправильной подготовкой образцов либо нарушением правил постановки реакцииНеправильные результаты (ложноотрицательные или ложноположительные) могут быть следствием определенных заболеваний и состояний (например, беременности, аутоиммунных патологий, ВИЧ, системных инфекций и т.д.)

Источник: https://hasanskiy-dv.ru/virusnyj-gepatit-s-ifa-diagnostika/

Ифа на гепатит с положительный

Ифа на гепатит с

Для того чтобы с высокой точностью определить вид гепатита после постановки предварительного диагноза, спрогнозировать течение заболевания, установить стадию его развития, используют различные серологические исследования. Наиболее точные данные получают после проведения иммуноферментного анализа.

Используя ИФА гепатит С, диагностируют в 95% случаев.

Именно данный анализ даёт возможность выявить антитела антивируса гепатита С (антивирус HCV) и оценить не только степень активности патологического процесса, но и уровень результативности противовирусной терапии, назначенной лечащим врачом и проведённой под его контролем.

Когда необходимо исследование и его особенности

Гепатит С является самым опасным видом данного заболевания, так как отличается длительным скрытым (латентным) периодом и опасными последствиями. Избежать появления и развития позволяет правильная и своевременная диагностика, одним из самых информативных методов которой признан иммуноферментный анализ.

Подтвердить наличие в крови пациента HCV инфекции можно с помощью серологических маркеров, а получить наиболее полные и достоверные данные о существовании антител позволяет анализ, который основан на комплексе структурных и неструктурных вирусных пептидов. У здоровых людей антитела к вирусу гепатита С в крови пациента отсутствуют, а их обнаружение свидетельствует о наличии патогена и развитии патологического процесса.

В ходе исследования специалисты выявляют суммарные антитела класса IgM и IgG, имеющие непосредственное отношение к структурным и неструктурным белкам HCV. Проведение данного исследования позволяет на ранней стадии заболевания выявить больных, инфицированных вирусом гепатита C. Присутствие суммарных антител в крови пациента говорит о начале болезни или перенесённой инфекции.

О начале заболевания свидетельствует наличие антител класса IgM, а о перенесённом гепатите типа С можно судить по выявленным антителам класса IgG. Они же становятся подтверждением реконвалесценции (заключительной стадии болезни).Для этого периода характерно анатомическое и функциональное восстановление поражённых недугом органов.

Своевременно проведённый ИФА (иммуноферментный анализ) позволяет на ранней стадии развития выявить патологический процесс, с высокой точностью диагностировать заболевание и увеличить шансы на быстрое выздоровление. Тест ИФА даёт возможность определить не только наличие вируса, но и количество специфических суммарных антивирус антител.

Исследование назначается:

  1. Женщинам в состоянии беременности при постановке на учёт в женской консультации.
  2. Пациентам, у которых обнаружены симптомы острого или хронического гепатита.
  3. Медицинским работникам, постоянно контактирующим с биологическими материалами.
  4. Пациентам с диагнозом СПИД.
  5. Наркозависимым гражданам.
  6. Больным алкоголизмом и тем, кто ведёт асоциальный образ жизни.

Направление на тест ИФА (иммуноферментный анализ) получают и сотрудники правоохранительных органов или работники коммунальных служб.

Необходимость в проведении ИФА возникает при подозрении на нарушение функциональности печени или при получении сомнительных данных о состоянии органа после ультразвукового исследования.

Врач может дать пациенту направление на иммуноферментный анализ крови, если последнему предстоит сложное хирургическое вмешательство. Если женщина (особенно в возрасте старше 30 лет) планирует беременность, а в анализе крови обнаружены повышенные значения билирубина или трансфераз (АЛТ, АСТ).

Специфические антивирусные антитела IgG обнаруживаются на протяжении нескольких лет. Их концентрация постепенно снижается, что является подтверждением положительной динамики. Что касается хронического гепатита С, то в этом случае количество суммарных анти-HCV антител не меняется. Точная диагностика основана на определении уровня содержания антител класса IgM.

Течение гепатита С зависит от генотипа вируса, ставшего причиной развития заболевания. Современной медицине известны 11 их разновидностей.

В самых сложных ситуациях возможно инфицирование сразу несколькими генотипами вируса, и один из них всегда оказывается доминирующим.

Только точная диагностика поможет выбрать наиболее эффективные лекарственные препараты для результативной терапии, подобрать их дозировку и установить длительность проведения терапевтических мероприятий.



Оценка результатов исследования

Для постановки диагноза при подозрении на наличие гепатита С и получения ориентировочной информации о количестве и качестве возбудителя проводится иммуноферментный анализ (ИФА), в ходе которого специалисты получают подтверждение присутствия в организме вируса и могут судить о его активности.

С помощью данного исследования можно сделать выводы о:

  • вирусной нагрузке;
  • степени риска развития хронического процесса;
  • активности воспроизведения (репликации) молекулы РНК вируса HCV;
  • продолжительности течения патологического процесса;
  • степени поражения печени.

Оценивается и уровень риска перехода заболевания в хроническую форму. Выявленные с помощью ИФА антивирус HCV антитела свидетельствуют о вирусной репликации. Конечные результаты требуют подтверждения с помощью более точных исследований.

Качественная оценка итога иммуноферментного анализа выражается как положительный или отрицательный результат. ИФА позволяет выявить гепатит С на ранней стадии развития недуга, а также при течении заболевания в безжелтушной форме.

Анализ имеет определённые преимущества, среди которых:

  1. Точность качественных и количественных показателей.
  2. Минимальные сроки исследования.
  3. Поэтапное проведение теста.

Иммуноферментный анализ принадлежит к числу обследований, отличающихся высокой точностью, но несмотря на все преимущества, в некоторых случаях не позволяет выявить возбудителя, присутствующего в организме человека.

Для исследования лаборант берёт венозную кровь пациента и помещает её в специальные ёмкости. Спустя определённое время антигены (чужеродные микроорганизмы) прикрепляются к стенкам сосуда. Специалист вводит в сосуд иммуноглобулины (антитела) и добивается иммунной реакции.

Полученные результаты сверяют с данными специально составленной таблицы. Результат оценивается как:

Положительный, свидетельствующий о наличии острой формы заболеваний, если в ходе исследования крови определяется наличие антител классов IgA, IgG, IgM.

Отрицательный – все три типа антител не выявлены, отсутствуют.

Ложноположительный – результат ИФА положительный, но не получивший подтверждения после проведения ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Сомнительный – маркеры в крови не определяются при наличии гепатита С. Такое возможно при слишком ранней диагностике. Требуется повторное проведение анализа через 2-3 недели. Для постановки точного диагноза делают анализ ПЦР.

Ложноотрицательный результат анализа возможен у пациентов, принимающих лекарственные препараты, оказывающие подавляющее действие на защитную систему организма.

Как ложноположительный, так и ложноотрицательный результаты проведённого анализа возможны по нескольким причинам.

В первую очередь – это минимальная вирусная нагрузка на самой ранней стадии развития заболевания. Не менее важно состояние иммунной системы пациента и индивидуальные особенности его организма.

На результатах исследования заметно сказывается приём лекарственных препаратов из числа иммунодепрессантов.

Нельзя быть полностью уверенным в точности результата иммуноферментного анализа, если пациентка – это женщина в состоянии беременности. Ложные результаты возможны и в тех случаях, когда анализ проводят пациентам, страдающим аутоиммунными недугами, онкологическими заболеваниями, имеющим доброкачественные новообразования.

Дополнительное исследование проводится в том случае, если пациент недавно перенёс тяжёлое инфекционное заболевание, у него диагностировано нарушение обмена веществ или сбой в работе эндокринной системы. Если в составе крови повышено содержание гепарина или заметно снижен уровень содержания микроэлементов.

Увеличить точность проведённого анализа можно, соблюдая существующие правила подготовки к его сдаче:

  1. Кровь сдают только натощак. Последний приём пищи разрешён не менее чем за 8-10 часов до забора материала.
  2. Вечером перед анализом требуется отказаться от употребления в пищу жирных, жареных, острых, копчёных продуктов и блюд.
  3. Не может быть речи об употреблении спиртосодержащих напитков.
  4. Лучше отказаться от курения за сутки до сдачи крови.

Делать иммуноферментный анализ можно только тем пациентам, которые в данное время не болеют простудными, воспалительными или инфекционными заболеваниями, не жалуются на недомогание.

Нарушение перечисленных правил и требований приводит к тому, что результат анализа оценивается как ложноположительный. Такая ситуация складывается в 15-20% случаев. Однако для полной уверенности врачи направляют пациентов на дополнительное обследование, в ходе которого им нужно сдать кровь на ПЦР.

Полимеразная цепная реакция

Постановка диагноза невозможна только на основании результатов иммуноферментного анализа. Наличие антител не является доказательством присутствия болезнетворного вируса в организме на момент исследования.

Ошибочное тестирование может спровоцировать нервный срыв или ещё более острую реакцию пациента. Постановка диагноза на основании результатов ИФА не является точной.

Требуется дополнительное исследование, по итогам которого и будет вынесен окончательный вердикт врачей.

Важно помнить, что ложноположительный результат анализа возможен у людей, которые в данный момент болеют другими инфекционными заболеваниями, однако их иммунная система неправильно отреагировала на проникновение в организм болезнетворных микроорганизмов или вирусов.

Диагностировать гепатит С позволяет ряд лабораторных исследований, особое место среди которых занимает иммуноферментный анализ (ИФА). Качественная оценка показателей определяется как положительный или отрицательный результат.

Отсутствие вируса гепатита в крови пациента – норма, но в некоторых случаях после проведённого исследования специалисты заявляют об обнаружении в биологическом материале незначительных концентраций некоторых фрагментов РНК (рибонуклеиновой кислоты).

Выявляют их с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Этот анализ крови даёт возможность выявить возбудителя гепатита С на ранней стадии развития заболевания и с высокой точностью поставить диагноз. Основано исследование на том, что вирусы имеют в составе структуры молекулы ДНК (гепатит B) или РНК (гепатит C).

В ходе анализа ПЦР с помощью специальной обработки образцов крови пациента:

  • увеличивают концентрацию молекул нуклеиновых кислот;
  • определяют их тип;
  • устанавливают вид возбудителя.

Если в крови человека есть небольшое количество фрагментов РНК возбудителя, то с помощью ПЦР все они будут выявлены. Это и даёт возможность поставить точный диагноз. Главное отличие данного анализа от всех иных методов исследования – на 100% точная диагностика.

Такой анализ проводится при исследовании крови беременных женщин, обратившихся в женскую консультацию для постановки на учёт, при подозрении на наличие гепатита С с длительным латентным (скрытым) периодом, при затруднении в постановке точного диагноза с помощью ИФА. Проведения ПЦР необходимо в тех случаях, когда после иммуноферментного анализа получен сомнительный результат.

Вирус гепатита С в данной ситуации есть в организме больного, но ещё не спровоцировал стремительное развитие недуга. Это и есть латентное течение заболевания.

Анализ делается довольно быстро, так как для получения результата нет необходимости выращивать возбудителя, используя питательную среду.

Главное отличие ПЦР от иммуноферментного анализа (ИФА) заключается в том, что в данном исследовании не существует такого понятия, как ложноположительный или сомнительный результат.

Источник: https://gepatit.su/diagnostika/ifa-gepatit-s

Ифа гепатит с: что делать если результат анализа положительный?

Ифа на гепатит с

ИФА гепатит С определяет эффективно, это один из методов диагностики заболевания, основанный на взаимодействии антигенов и антител. Иммунохимическая реакция путем ИФА (иммуноферментного анализа) позволяет выявить в организме анти-HCV антитела.

Метод дает возможность дифференциальным путем диагностировать у человека гепатит С, определить стадию развития заболевания, спрогнозировать его течение.

Выявление специфических серологических маркеров позволяет также подобрать эффективное противовирусное лечение патологии.

Особенности метода

Анализ на выявление в крови человека антител к вирусу гепатита типа C проводится путем присоединения к молекуле иммуноглобулина чужеродного микроорганизма (антигена). Присоединенный энзимный фермент играет роль своеобразной метки. Она позволяет проследить за иммунохимической реакцией, а также одним из ее компонентов.

В качестве компонентов иммуноферментного анализа могут выступать:

  • антитела;
  • антитела, помеченные специальным ферментом;
  • антигены;
  • субстраты ферментов;
  • индикаторные красители.

При попадании в организм человека вредоносных чужеродных микроорганизмов защитные силы начинают вырабатывать иммуноглобулины (антитела). Впоследствии они воздействуют на антигены и нейтрализуют их.

Такое взаимодействие приводит к образованию антитела-антигена, имеющего свои показатели количества и качества. Именно они свидетельствуют о наличии либо отсутствии в организме HCV-инфекции.

В случае если результат иммуноферментного анализа положительный, имеет место вирус гепатита типа С.

Современные технологии в медицине позволяют значительно сократить сроки выявления вируса гепатита, протекающего в острой форме. Благодаря диагностическим системам третьего поколения также представляется возможным повысить специфичность и чувствительность иммунохимической реакции.

Основным исследуемым материалом при проведении ИФА выступает венозная кровь (в том числе донорская). По показаниям могут производить забор спинномозговой жидкости или околоплодных вод.

Положительный результат метода ИФА на гепатит типа С не всегда свидетельствует о наличии вирусной инфекции в организме. В более чем 35 % случаев в крови вирусных антигенов не обнаруживается, что приводит к ложноположительному результату.

Метод позволяет следить за количественными и качественными изменениями, разграничением острой и хронической формы гепатита С. Однако для определения активности патологического процесса он малоэффективен. Для более точного подтверждения наличия HCV-инфекции следует применять также другие методы диагностики патологии.

Показания к проведению ИФА

Метод выявления видовой и количественной концентрации чужеродных микроорганизмов (антигенов) при помощи иммуноглобулинов и ферментов проводится в несколько этапов. На основании изменения цвета и количественного показателя фермента врач может диагностировать у человека гепатит типа C.

В большей степени заболеванию подвержены следующие категории людей:

  1. Пациенты, перенесшие хирургические вмешательства, а также заболевания внутренних органов и систем.
  2. ВИЧ-инфицированные (инфицированные вирусом иммунодефицита человека). Большой процент людей, входящих в эту группу, составляют наркозависимые люди.
  3. Медицинские работники.
  4. Сотрудники правоохранительных органов.
  5. Беременные женщины.

Гепатиты вирусного происхождения нередко приводят к развитию онкологического заболевания (например, рака печени). Именно поэтому сдавать кровь на иммуноферментный анализ следует в первую очередь людям, входящим в основную группу риска, а также больным с острой либо хронической формой гепатита.

По показаниям врач может назначить проведение метода ИФА пациентам, у которых диагностируется:

  • ИППП (инфекции, передающиесяполовым путём);
  • заболевания вирусной природы происхождения (папилломавирус, герпетическая инфекция, гепатит и т. д.);
  • аллергический характер патологии;
  • иммунодефицитное состояние;
  • онкология.

Метод ИФА позволяет лечащему врачу оценить эффективность назначенной медикаментозной терапии, определить гормональный уровень пациента. Перед хирургическим вмешательством одним из необходимых исследований также выступает лабораторное изучение крови.

Преимущества и недостатки

ИФА гепатит С позволяет выявлять на ранней стадии, а также в бессимптомной и безжелтушной формах. Как и у любого метода диагностики, он имеет ряд преимуществ и недостатков.

Среди положительных особенностей ИФА специалисты выделяют:

  1. Точность качественных и количественных показателей. Чувствительность метода превышает другие исследования на выявление гепатита в десятки раз.
  2. Значительное сокращение сроков выявления вирусной инфекции благодаря современным диагностическим системам.
  3. Невысокая цена по сравнению с другими исследованиями на выявление гепатита у человека.
  4. Возможность диагностирования заболевания печени на ранней стадии при отсутствии выраженных симптомов.
  5. Поэтапное проведение исследования с использованием автоматизированных процессов.

Несмотря на высокую точность ИФА, более чем в 35 % случаев при положительном результате вирус гепатита у пациента не выявляется. Нередко тест не подтверждает патологию, что свидетельствует о сомнительном или отрицательном результате.

На достоверность исследования в той или иной степени влияет:

  1. Прием лекарственных препаратов.
  2. Нарушения обменных процессов в организме.
  3. Наличие некоторых патологий хронического характера, способствующих активной выработке иммуноглобулинов.

Учитывая недостатки результатов опыта инвитро методом ИФА, пациенту назначаются дополнительные исследования. Для достоверного обнаружения антител к вирусной инфекции гепатита С применяется метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) либо RIBA (рекомбинантный иммуноблоттинг).

Если делать ПЦР-анализ, можно практически со 100 % точностью обнаружить количественные и типовые показатели любого возбудителя хронического заболевания с вялотекущим течением.

Что выявляет и как проводится исследование

Анализ методом ИФА способен выявить широкий ряд заболеваний у человека.

Помимо обнаружения антител гепатита всех видов, положительный результат теста может свидетельствовать о наличии в организме следующих патологий:

  • вируса иммунодефицита человека;
  • герпетической инфекции;
  • сифилиса;
  • ИППП (уреаплазмоза, хламидиоза и др.);
  • папилломавируса;
  • цитомегаловируса.

Исследование также является своеобразным маркером по обнаружению злокачественных новообразований, генетических патологий, гормональных нарушений, а также сбоев в функционировании эндокринной системы.

Подготовка к сдаче биологического материала на выявление вируса гепатита С подразумевает отказ от приема пищи и медикаментов за 12 часов до проведения исследования. Также необходимым условием является воздержание от употребления алкоголя, жирных, жареных и соленых блюд.

В медицинской практике применяются методы прямого и непрямого иммуноферментного анализа. Каждый из них проводится поэтапно.

Прямой метод ИФА

Основные этапы при проведении прямого теста заключаются в следующем:

  1. Вначале лаборант производит забор крови из вены (либо другого биологического материала), а затем помещает ее в специальные емкости.
  2. Чужеродные микроорганизмы (антигены) в течение 20 минут начинают прикрепляться к ним.
  3. Специалист добавляет иммуноглобулины (антитела) к найденным антигенам для образования иммунной реакции. При этом компоненты оставляются на несколько часов.
  4. Неприкрепленные антигены удаляются путем выливания содержимого из емкостей.
  5. Материал ополаскивается раствором, а затем обрабатывается ферментами и оставляется на один час.
  6. Цвет и концентрация содержимого анализируются благодаря использованию колориметрии.

Если количественный показатель содержимого превышает допустимые нормы, то это свидетельствует о наличии вируса гепатита С в организме человека.

Непрямой метод ИФА

Подразумевает взаимодействие непомеченных иммуноглобулинов с антигенами, к которым впоследствии присоединяют помеченные антитела.

В начале у пациента берется кровь из вены. Затем биологический материал помещается в специальные емкости примерно на полчаса. При этом непомеченные антитела присоединяются к стенкам емкостей. Затем к ним добавляются помеченные антитела. В результате их взаимодействия образуется иммунный комплекс «антитело-антиген».

По истечении 4 часов содержимое емкостей выливается, а неприкрепленные микроэлементы удаляются. Лаборант присоединяет помеченные антитела к уже образовавшемуся комплексу, при этом происходит иммунная реакция «антитело-антитело-антиген».

После повторного удаления незакрепленных микроэлементов в емкость добавляется специальный фермент, меняющий цвет и количественные показатели содержимого. На основании полученного результата специалист сверяет данные и делает заключение.

Непрямой метод считается более достоверным способом выявления вируса гепатита С в организме. Полученная иммунная реакция позволяет также определить наличие иных заболеваний и патологических изменений в органах и системах человека.

Расшифровка результатов

При проведении ИФА внимание уделяется наличию либо отсутствию антител классов IgA, IgG и IgM. Количественные показатели этих антител сверяются с данными специальной таблицы.

Согласно ей, расшифровка результатов сводится к следующему:

  1. Если все три типа показателей не определяются, у человека наблюдается полное выздоровление.
  2. При одновременном положительном результате по всем трем показателям, наблюдается острая форма вирусной инфекции.
  3. Если определяются антитела класса IgG, при этом остальные классы не выявлены, то у человека развился постинфекционный иммунитет.
  4. На хронический характер заболевания указывают положительные показатели антител классов IgG и IgA. При этом они остаются неизменными даже после медикаментозного лечения.
  5. При положительном выявлении всех трех типов антител может наблюдаться рецидив хронического характера гепатита.

Согласно статистическим данным, уровень IgM начинает повышаться через несколько дней после попадания инфекции в организм, что свидетельствует о ранней стадии патологии.

IgG антитела обычно проявляются через 2 недели после начала заболевания и находятся в крови на протяжении длительного периода времени (даже после выздоровления).

Антитела IgA обнаруживаются через 2 недели, при этом после медикаментозной терапии их концентрация в организме снижается.

Время ожидания результатов теста составляет от 1-10 дней. При этом следует учитывать характер заболевания и возможности медицинской лаборатории.

Помните, что гепатит С ИФА положительный не всегда свидетельствует о наличии инфекции. Нередко тест считается ложноположительным, что требует повторной сдачи крови. В некоторых случаях пациенту назначают дополнительные исследования для более точного определения показателей крови.

Основным критерием при проведении теста является точное выявление количественных и типовых показателей. Они позволяют определить не только наличие вируса, но и форму заболевания. Диагностика гепатита С при помощи современных методов позволит начать своевременную медикаментозную терапию и минимизировать негативные последствия.

Источник: https://pechen1.ru/gepatit/c/ifa.html

Анализ ИФА на гепатит С: что это такое, показания, расшифровка

Ифа на гепатит с

Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.

Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.

Что такое ИФА?

Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.

Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.

Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.

ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.

В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.

Показания к ИФА на гепатит С

Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:

  • острых и хронических заболеваниях печени;
  • обследовании перед хирургическими вмешательствами;
  • стандартном обследовании доноров крови;
  • постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;
  • профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;
  • незащищенном сомнительном половом контакте;
  • рождении детей от инфицированных матерей.

:  Чем лечить гепатит С: препараты из Индии, Египта и России

В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.

Как проводится анализ?

За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.

Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).

Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:

  1. На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
  2. На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
  3. Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.

Виды ИФА

Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:

  • По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:a) конкурентный;b) неконкурентный;
  • По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:a) гомогенные;b) гетерогенные;
  • 3) По принципу определения исследуемого вещества:a) прямой;b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.

Непрямой метод

При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.

  1. В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
  2. В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
  3. В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
  4. Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.

Положительный

При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.

:  Беременность и роды с гепатитом С: последствия для ребенка

Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.

Отрицательный

Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.

Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.

Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.

Ложноположительный

ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:

  • выполненной накануне вакцинации;
  • при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;
  • инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).

Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.

Ифа положительный, а пцр отрицательный: что это значит?

Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».

Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.

Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.

Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.

Источник: https://progepatity.ru/gepatit-c/ifa-na-gepatit-c

Исследования на вирус гепатита С

Ифа на гепатит с

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков вируса гепатита С.

Это исследование является скрининговым для выявления пациентов с ВСГ.

Суммарные антитела к вирусу гепатита С можно выявить в первые 2 недели заболевания, и их присутствие свидетельствует о возможной инфицированности вирусом или перенесенной инфекции.

Однозначный ответ на основании результатов данного теста получить невозможно, так как тест определяет суммарные антитела IgM и IgG. Если это ранний период острого вирусного гепатита С, то об этом свидетельствуют антитела IgM, а если это период реконвалесценции или состояние после перенесенного ВГС, то на это указывают антитела IgG.

Антитела IgG к ВГС могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8-10 лет с постепенным снижением их концентрации. Возможно позднее обнаружение антител спустя год и более после инфицирования. При хроническом гепатите С суммарные антитела определяются постоянно. Поэтому для уточнения сроков инфицирования необходимо отдельно определить антитела класса IgM к ВГС.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС в сыворотке крови.

Положительный результат – выявление суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, перенесенном вирусном гепатите С или хроническом вирусном гепатите С.

Однако обнаружение суммарных антител к ВГС недостаточно для постановки диагноза ВГС и требует подтверждения для исключения ложноположительного результата исследования.

Поэтому при получении положительного результата скринингового исследования на суммарные антитела к ВГС в лаборатории проводится подтверждающий тест.

Окончательный результат определения суммарных антител к ВГС выдается совместно с результатом подтверждающего теста.

Антитела к вирусу гепатита С JgM

Антитела к вирусу гепатита С JgM в сыворотке в норме отсутствуют. Наличие антител класса JgM к ВГС в крови пациента позволяет верифицировать активную инфекцию. Антитела класса JgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С.

Антитела класса JgM к ВГС появляются в крови пациента спустя 2 недели после развития клинической картины острого вирусного гепатита С или обострения хронического гепатита и обычно исчезают спустя 4-6 месяцев. Снижение их уровня может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии.

Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)

Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует.
В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.

Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания.

Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР – более информативный метод диагностики.

https://www.youtube.com/watch?v=b9NON5AovRU

Качественное выявление ВГС методом ПЦР в крови свидетельствует о виремии, позволяет судить о размножении вируса в организме и является одним из критериев эффективности противовирусной терапии.

Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 50-100 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность – 98%.

Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.

Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.

Согласно рекомендациям ВОЗ для подтверждения диагноза вирусного гепатита С необходимо троекратное выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента.

    Обнаружение РНК вируса гепатита С методом ПЦР используется в целях:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • дифференциация гепатита С от других форм гепатита;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом; определения стадии инфицированности новорожденных от серопозитивных по вирусу гепатита С матерей;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.

Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (количественно)

Количественный метод определения содержания РНК вируса гепатита С в крови дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Аналитическая чувствительность метода составляет от 5.102 копий/мл вирусных частиц в сыворотке крови, специфичность – 98%.

Уровень виремии оценивают следующим образом: при содержании РНК ВГС от 102 до 104 копий/мл – низкий; от 105 до 107 копий/мл – средний и выше 108 копий /мл – высокий.

Количественное определение содержания РНК ВГС в сыворотке крови методом ПЦР имеет важное значение для прогноза эффективности лечения интерфероном-альфа. Показано, что наиболее благоприятный прогноз заболевания и наибольшую вероятность положительного ответа на противовирусную терапию имеют лица с низким уровнем виремии. При эффективном лечении уровень виремии снижается.

Генотипирование вируса гепатита С – определение генотипа

Метод ПЦР позволяет не только выявить РНК ВГС в крови, но и установить его генотип. Наиболее важное значение для клинической практики имеют 5 субтипов ВГС – 1а, 1b, 2а, 2b и 3а. В нашей стране наиболее часто встречается субтип 1b, далее идут 3а, 1а, 2а.

Определение генотипа (субтипа) вируса имеет важное значение для прогноза течения ВГС и подбора пациентов с хроническим ВГС к проведению лечения интерфероном-альфа и рибавирином.

При инфицировании пациента субтипом 1b хронический ВГС развивается примерно в 90% случаев, при наличии субтипов 2а и 3а – в 33-50%.

У пациентов с субтипом 1b заболевание протекает в более тяжелой форме и часто заканчивается развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы.

При инфицировании субтипом 3а у больных более выражен стеатоз, поражение желчевыводящих путей, активность АЛТ и менее выражены фиброзные изменения в печени, чем у пациентов с субтипом 1b.

    Показаниями к лечению хронического ВГС интерфероном–альфа являются:

  • повышение уровня трансаминаз;
  • наличие РНК ВГС в крови;
  • генотип 1 ВГС;
  • высокий уровень виремии в крови;
  • гистологические изменения в печени: фиброз, умеренные или выраженные воспалительные явления.

При лечении интерфероном-альфа больных вирусным гепатитом С с субтипом 1b эффективность терапии отмечается в среднем в 18% случаев, у инфицированных другими субтипами – в 55%. Использование комбинированной схемы лечения (интерферон-альфа + рибавирин) повышает эффективность терапии. Стойкий ответ наблюдается у 28% больных с субтипом 1b и у 66% – с другими субтипами ВГС.

Источник: https://www.gepatit.ru/gepatit-c-analysis/

Ваш лекарь
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: